Agar TCBS es un medio selectivo ampliamente utilizado para aislar y cultivar prácticamente todas las bacterias del género Vibrio, incluyendo V. cholerae y V. alginolyticus, patógenas para los humanos que causan cólera, diarrea colérica o intoxicación alimentaria por alimentos contaminados y por muestras de heces.

Los últimos dos casos en concreto pueden ser causados por la ingestión de pescado o mariscos crudos o parcialmente procesados que contienen Vibrio parahaemolyticus. El único Vibrio que no crece en TCBS es V. hollisae.

Las peptonas de carne y caseína proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. El citrato sódico, el tiosulfato sódico y la bilis de buey son los agentes selectivos que inhiben las bacterias Grampositivas.

El tiosulfato de sodio proporciona azufre, y el citrato férrico es el indicador de la producción de H?S. La sacarosa es la fuente de energía de carbohidratos. El azul de bromotimol y el azul de timol son indicadores de pH. El cloruro de sodio promueve el crecimiento (Vibrio crece bien en medios salados). El agar bacteriológico es el agente solidificante.

El pH alcalino del medio mejora la recuperación de V. cholerae.

Los vibrios sacarosa-positivos, como Vibrio cholerae y Vibrio alginolyticus, aparecen amarillos en TCBS. Los sacarosa-negativos como Vibrio parahaemolyticus y Vibrio vulnificus producen colonias verde azuladas. La mayoría de Vibrio fermentan sacarosa y producen colonias amarillas a partir de la producción de ácido. Algunos tipos de Proteus (fermentadores de sacarosa) pueden formar colonias amarillas similares a las de Vibrio.

Para diagnóstico clínico (muestras: heces, vómitos y torundas rectales):

• Inocular en superficie mediante estrías paralelas con el asa o hisopo
• Incubar en condiciones aeróbicas a 35±2°C durante 18–24 horas
• Lectura e interpretación de los resultados

Para otros usos (detección según ISO 21872):

Detección de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae y Vibrio vulnificus potencialmente enteropatógenos:

• Tomar porciones de prueba (25 g o 25 ml) y homogeneizar en 225 ml de medio de enriquecimiento ASPW. En el caso de tener grandes cantidades de la porción de prueba, el ASPW debe calentarse a 37±1°C / 41,5±1°C antes de la inoculación
• Incubar la suspensión inicial a 41,5±1°C / 37±1°C durante 6±1 horas
• Transferir 1 ml de la superficie a un tubo con 10 ml de ASPW
• Incubar el ASPW a 41,5±1°C / 37±1°C durante 18±1 horas
• A partir del cultivo obtenido en el ASPW, inocular 1 ?l en agar TCBS. Incubar un segundo medio de aislamiento selectivo
• Incubar a 37±1°C durante 24±3 horas
• Confirmación

Suspender 88 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver calentando con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo.

NO SOBRECALENTAR. NO AUTOCLAVAR.

Dejar enfriar a 50°C antes de usar.