Principios y Usos
Agar Dextrosa Sabouraud se puede utilizar para cultivar levaduras, mohos (como hongos patógenos, particularmente aquellos asociados con infecciones de la piel) y microorganismos acidúricos. Este medio también se usa para determinar el contenido microbiano y fúngico de los cosméticos y para la evaluación micológica de los alimentos.
La fórmula se basa en la Farmacopea Europea. La dextrosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. La mezcla de peptona proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El agar bacteriológico es el agente solidificante. La alta concentración de dextrosa y el pH ácido hacen que este medio sea selectivo para los hongos.
Georg et al. demostraron que el agar básico enriquecido con tres antibióticos mejora considerablemente el aislamiento de hongos patógenos de fuentes altamente contaminadas. Para preparar un medio de cultivo selectivo agregar asépticamente lo siguiente por cada litro del medio antes de usar: 0,4 g de cicloheximida; 20 unidades de penicilina; 40 mg de estreptomicina.
Se puede obtener un medio de Sabouraud muy rico disolviendo el medio en un litro de infusión de corazón (Cat. 1714).
Normativas: Farmacopea Europea (párrafos 2.6.12 y 2.6.13), USP, ISO 11133, ISO 16212
Farmacéutica Veterinaria Clínica Alimentación Cosmética Control de Producto Final
Instrucciones de Uso
Diagnóstico Clínico
Tipo de muestras: cabello, piel, uñas, raspados cutáneos. Si las muestras están formadas por raspados de piel, cabello o uñas, colocar el material en el centro de la superficie del medio.
Inoculación: En superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo.
Incubación: Condiciones aeróbicas a 30±2°C durante 18-48 horas y hasta 7 días si fuera necesario.
Farmacopea Europea — Examen TYMC en Productos
Filtración por membrana:
- Preparar la muestra y transferir la cantidad apropiada a un filtro de membrana
- Colocar la membrana en la superficie de Agar Dextrosa Sabouraud
- Incubar a 20-25°C durante 5-7 días
Métodos de recuento en placa:
- Preparar la muestra
- Inocular las placas de acuerdo con el método de siembra en profundidad o siembra en superficie
- Incubar las placas a 20-25°C durante 5-7 días
- Seleccionar las placas correspondientes a una dilución dada y que muestren el mayor número de colonias menor de 50
Farmacopea Europea — Prueba de Candida albicans en Productos
- Preparar el producto a examinar y usar 10 ml o la cantidad correspondiente a no menos de 1 g o 1 ml para inocular 100 ml de Caldo Dextrosa Sabouraud
- Incubar a 30-35°C durante 3-5 días
- Subcultivo en una placa de Agar Dextrosa Sabouraud
- Incubar a 30-35°C durante 24-48 horas
- El crecimiento de colonias blancas puede indicar la presencia de C. albicans. Confirmar mediante pruebas de identificación
- El producto cumple con la prueba si dichas colonias no están presentes o si las pruebas de confirmación son negativas
Preparación
Suspender 65 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta la disolución completa. Distribuir en recipientes adecuados y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 minutos.
PRECAUCIÓN: NO SOBRECALENTAR, ya que facilita la hidrólisis de los componentes y que el medio permanezca blando.
