Principios y Usos
El Medio Reforzado para Clostridios es un medio semisólido recomendado para el cultivo y la enumeración de anaerobios, particularmente Clostridium y otros microorganismos en alimentos y otras muestras.
Fue formulado por Hirsch y Grinstead en 1954. Su trabajo demostró que el medio superó a otros medios para respaldar el crecimiento de Clostridium a partir de un inóculo pequeño y produjo mayores recuentos de células viables.
La peptona y el extracto de carne proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es la fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. La dextrosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. El cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico.
El almidón en el medio actúa como un factor de crecimiento, probablemente funciona como un protector coloide y neutraliza los productos tóxicos que se forman durante el desarrollo de los organismos. El clorhidrato de cisteína es el agente reductor y el acetato de sodio es el tampón.
Dado que el medio no es un enriquecimiento selectivo, permite el crecimiento de diversos microorganismos anaeróbicos y bacterias facultativas cuando se incuba en condiciones anaeróbicas.
La Farmacopea Europea y USP recomiendan el Medio Reforzado para Clostridios en el Párrafo 2.6.13 "Microbiological examination of non-Sterile products: test for specified microorganisms" para la prueba de clostridios en productos.
Cumplimiento normativo: Conforme a Farmacopea Europea 9.0 y USP para prueba de microorganismos específicos (Clostridia).
Preparación
Suspender 38 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente.
Hervir durante un minuto hasta su completa disolución. Dispensar en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Enfriar a 45-50°C y, si se desea, agregar 0,02 g/L de polimixina B en una solución filtrada estéril.
