Principios y Usos

La Base de Agar Raka-Ray es un medio selectivo para el aislamiento de bacterias del ácido láctico en procesos de elaboración de cerveza y en muestras de cerveza. Da muy buenos resultados en la detección de lactobacilos en los procesos de fermentación de la cerveza.

Estos organismos pueden cambiar las características organolépticas de la cerveza a través de sus metabolitos. La detección es complicada debido a los requisitos nutricionales y ambientales de estos organismos. Por estas razones, se han descrito varias formulaciones para optimizar el medio y obtener un buen crecimiento.

Se han obtenido mayores recuentos de lactobacilos en pruebas comparativas con este medio porque contiene nutrientes de crecimiento y estimulantes como el extracto de hígado, extracto de levadura, triptona, N-acetilglucosamina y monooleato de sorbitán. La maltosa y la fructosa se agregan como fuentes de carbohidratos cuando ciertos lactobacilos no pueden usar la glucosa.

La selectividad se obtiene agregando 3 g/L de feniletanol, para inhibir las bacterias gramnegativas, y la cicloheximida para inhibir las levaduras. Las sales de sulfato proporcionan iones inorgánicos. El clorhidrato de betaína se utiliza como agente estimulante del crecimiento. El di-amonio hidrógeno fosfato y el fosfato de potasio son agentes tamponantes. El aspartato de potasio y el glutamato de potasio son fuentes adicionales de aminoácidos. El agar bacteriológico es el agente solidificante.

Lactobacillus fermentum crece formando colonias de color crema-blanca. Si el número de colonias en cada placa excede de 300, diluir la muestra 1:10 en solución salina estéril y volver a realizar la prueba.

Instrucciones de Uso

Técnica de superposición:

1. Inocular 0,1 ml de la muestra en placas bien secas que contengan 15-20 ml de Agar Raka-Ray.
2. Extender sobre la superficie del medio con una varilla de vidrio estéril.
3. Cubrir la superficie con 4 ml del medio esterilizado, fundido y enfriado a 50°C.
4. Incubar las placas a 25-30°C durante 4-7 días.

Nota: Dependiendo del tipo de microorganismos, incubar o no en anaerobiosis.

Preparación del Medio

Suspender 77,2 gramos del medio en un litro de agua destilada. Añadir 10 ml de monooleato de sorbitán. Mezclar bien y disolver por calentamiento con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta su completa disolución.

Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. NO SOBRECALENTAR.

Enfriar a 45-50°C y agregar asépticamente 3 gramos de feniletanol. Mezclar bien y dispensar en placas.

Fórmula (g/L)