Principios y Usos

Medio de cultivo semisólido altamente nutritivo para diferenciación de Enterobacterias basándose en la Movilidad, la producción de Indol y descarboxilación de la Ornitina. Formulado por Ederer, Clark, Oberhofer y Hajkowski.

La Peptona de gelatina y caseína proveen nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales necesarios para el desarrollo de los microorganismos, además de triptófano necesario para la producción de indol. El extracto de levadura es fuente de vitaminas del complejo B. La dextrosa es el carbohidrato fermentable que provee carbono y energía. La ornitina es el sustrato para la detección de la enzima ornitina descarboxilasa.

El púrpura de bromocresol actúa como indicador de pH. El indol se produce a partir del triptófano por microorganismos que contienen triptofanasa; después de agregar 2-3 gotas de reactivo de Kovacs, un color rojo indica resultado positivo. El agar permite demostrar la movilidad que puede observarse por enturbiamiento del medio o crecimiento que difunde más allá de la línea de inoculación.

Uso y Procedimiento

Inoculación: Inocular cada tubo por picadura en el centro hasta las 2/3 partes, de acuerdo a los procedimientos establecidos.

Incubación: Incubar aeróbicamente con las tapas flojas a 35±2°C durante 18-24 horas. Si la reacción de indol es negativa, incubar por 24 horas adicionales.

Interpretación de resultados:

• Ornitina positiva: Sin cambio de color o color púrpura intenso
• Ornitina negativa: Cambio de color de púrpura a amarillo
• Movilidad positiva: Turbidez en el medio
• Movilidad negativa: Crecimiento solo en la picadura
• Indol positivo: Anillo rosa a rojo al adicionar 3-4 gotas de reactivo de Kovacs

Preparación

Suspender 31 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar bien y calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Dispensar en tubos y tapar. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar en posición vertical.

pH final: 6.5 ± 0.2 a 25°C

Fórmula (g/L)

Control de Calidad

El medio preparado debe ser púrpura claro y semisólido. Las pruebas de rendimiento se realizan según procedimientos establecidos para cada microorganismo de referencia.