Medio Diferencial Selectivo
Agar Eosina y Azul de Metileno (EMB)
Para el aislamiento, cultivo y diferenciación de bacilos entéricos Gram negativos de muestras clínicas y de otro tipo
Bacteriología Clínica Cat. 1039
Principios y Usos
Agar Eosina y Azul de Metileno (EMB) es un medio diferencial similar al Agar Levine EMB (Cat. 1050), utilizado para el aislamiento de Enterobacterias. El uso de eosina Y y azul de metileno permite la diferenciación entre organismos fermentadores de lactosa y no fermentadores. Es ampliamente utilizado en bacteriología médica, en técnicas recomendadas por APHA y para la detección y enumeración de coliformes, contaminantes de alimentos y agua potable.
La peptona proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. La sacarosa se agrega a la lactosa como un carbohidrato fermentable para detectar coliformes que fermentan la sacarosa más fácilmente que la lactosa. Los colorantes eosina Y y el azul de metileno son inhibidores parciales de bacterias Gram-positivas e indicadores de pH.
Debido a la lactosa y la sacarosa, este medio puede ser diferencial en el cultivo primario: Salmonella y Shigella que son lactosa-negativas se pueden diferenciar de otros organismos negativos a la lactosa y la sacarosa como Proteus vulgaris, Citrobacter y Aeromonas. El fosfato dipotásico actúa como un sistema tampón y el agar bacteriológico es el agente solidificante.
Aplicaciones
Aislamiento selectivo Diferenciación Bacilos entéricos Gram negativos Industria clínica
Preparación del Medio
Suspender 36 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver calentando con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C, mezclar bien, evitar la formación de burbujas y dispensar cuidadosamente en placas de Petri. NO SOBRECALENTAR.
pH final: 7,2 ± 0,2 a 25°C
Fórmula Típica
| Componente | g/L |
| Agar bacteriológico | 13,5 |
| Peptona bacteriológica | 10 |
| Lactosa | 5 |
| Sacarosa | 5 |
| Fosfato dipotásico | 2 |
| Eosina Y | 0,4 |
| Azul de metileno | 0,065 |
| Total | 36 g/L |
*Fórmula ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.
Instrucciones de Uso
Para el aislamiento de patógenos entéricos a partir de muestras clínicas. Tipo de muestra: orina y heces.
- Inocular una placa Agar EMB y hacer estrías permitiendo el desarrollo de colonias aisladas.
- Incubar a 35±2°C y observar a las 24 horas y de nuevo a las 48 horas.
Características de las Colonias
- Las colonias de Salmonella y Shigella son translúcidas y de color ámbar o incoloras.
- Los coliformes que usan lactosa y/o sacarosa producen colonias azul oscuro con centros oscuros y un brillo metálico verdoso.
- Otros coliformes como Enterobacter forman colonias mucoides rosadas.
- Las cepas de Enterococcus faecalis se inhiben parc
