Medio Selectivo para Salmonella
Agar Bismuto Sulfito (Wilson Blair) USP
Medio altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp, particularmente Salmonella typhi, a partir de muestras clínicas
Principios y Usos
El Agar Bismuto Sulfito (Wilson Blair) es una modificación del Wilson Blair Medium, generalmente aceptado como medio de rutina para la detección de la mayoría de Salmonella, en particular Salmonella typhi.
La peptona y el extracto de carne proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. La dextrosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. El indicador de sulfito de bismuto y el verde brillante son inhibidores de bacterias Gram positivas y miembros del grupo de coliformes. El fosfato disódico actúa como sistema tampón y el agar bacteriológico es el agente solidificante.
El sulfato ferroso está incluido para la detección de la producción de H₂S. Cuando el H₂S está presente, Salmonella spp reduce las sales de hierro al sulfato de hierro, que produce una colonia negra y convierte el indicador de bismuto en bismuto metálico, que rodea el área de las colonias con un brillo brillante.
Características de colonias:
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S. typhi: colonias negras rodeadas de zona negra o marrón, con brillo metálico. En crecimiento pesado pueden aparecer como colonias de color verde claro.
- Otras cepas de Salmonella: colonias de negro a verde con poco o ningún oscurecimiento del medio circundante.
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Shigella spp (excepto S. flexneri y S. sonnei): no crece. Las cepas que crecen son de color marrón a verde, elevadas con apariencia de cráter.
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E. coli: parcialmente inhibido, ocasionalmente crece como colonias brillantes marrón-verdosas.
- Algunas cepas de Enterobacter: colonias mucoides elevadas con brillo plateado más claro que S. typhi.
Instrucciones de Uso
Tipo de muestra: Heces (diagnóstico clínico)
Procedimiento:
- Inocular el Agar de Sulfito de Bismuto rayando la superficie para obtener colonias aisladas.
- También se puede usar el método de inoculación de vertido en placa, mezclando la muestra con el medio líquido y permitiendo que la placa se solidifique.
- Incubar todas las placas entre 40 y 48 horas a 35±2°C.
Nota importante: Las placas solidificadas deben tener una apariencia uniforme, opaca, de color crema a verde pálido. Si se mantiene en refrigeración, el medio se oxidará lentamente. Se recomienda mantener las placas refrigeradas durante 4 días antes de su uso para reducir la inhibición y así poder aislar Salmonella en muestras menos contaminadas.
Preparación del Medio
Suspender 52,3 gramos del medio en 1 litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta la disolución completa.
⚠ EVITAR SOBRECALENTAR. NO AUTOCLAVAR.
Enfriar a 45°C (muy importante), mezclar bien y dispensar en placas.
✓ pH final: 7,5 ± 0,2 a 25°C
