Bile Esculin Agar ISO Fco. 500 g.
Agar Bilis Esculina ISO
Aislamiento e identificación presuntiva de enterococos y estudio de fermentación de esculina por Yersinia
Principios y Usos
El Agar Bilis Esculina es ideal para el aislamiento y diferenciación de enterococos intestinales, basado en la hidrólisis de la esculina en presencia de bilis.
El medio también está recomendado por la ISO 10273 para los estudios de fermentación de esculina por Yersinia. El test de esculina debe llevarse a cabo para determinar la presunta patogenicidad, ya que las cepas de Yersinia enterocolitica son esculina negativa. Un halo negro alrededor de las colonias indica una reacción positiva. Esta prueba de fermentación de esculina es equivalente a la prueba de fermentación de la salicina.
Los organismos positivos para hidrólisis de esculina hidrolizan el glicósido esculina a esculetina y dextrosa. La esculetina reacciona con el citrato férrico y da lugar a colonias marrón oscuro o negras. Las sales biliares no inhiben los enterococos, mientras que otras bacterias Grampositivas sí.
El extracto de carne y la peptona suministran los nutrientes esenciales para el crecimiento. El agar bacteriológico es el agente solidificante.
La tolerancia a la bilis y la habilidad de hidrolizar la esculina constituye un test seguro para la identificación presuntiva de enterococos. El color marrón (reacción positiva) alrededor de las colonias aparece después de 18-24 horas de incubación a la temperatura de 35±2°C.
Aplicaciones: La presencia de enterococos intestinales es un indicador de contaminación fecal, especialmente cuando la contaminación se produjo mucho antes y las bacterias coliformes menos resistentes, incluyendo Escherichia coli, ya pueden estar muertas cuando se lleva a cabo el análisis.
Instrucciones de Uso
Diagnóstico Clínico
Tipo de muestra: bacterias aisladas de heces
- Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo
- Incubar en condiciones aeróbicas a 35±2°C durante 18-24 horas
- Lectura e interpretación de los resultados
Aislamiento e Identificación Presuntiva de Enterococos
- Sembrar la superficie inclinada del agar
- Incubar a 35±2°C durante 18-24 horas
- Los cultivos positivos se confirman en Agar KAA confirmativo (Cat. 1027) o Agar Estreptocócico KF (Cat. 1034)
Confirmación de Yersinia enterocolitica Patógena (ISO 10273)
- De las colonias seleccionadas para confirmación en el Agar CIN, se siembran las bacterias en estrías sobre la superficie del Agar Bilis Esculina inclinado
- Incubar a 30°C durante 24±2 h
- La aparición de un halo de color negro alrededor de las colonias indica que la reacción es positiva
Preparación
Suspender 64,5 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver completamente. Dispensar en recipientes adecuados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Un sobrecalentamiento puede causar un oscurecimiento del medio. Si se usan tubos, enfriarlos en posición inclinada.
pH final: 6,6 ± 0,2 (a 25°C) · Medio compatible con normas ISO 10273
Fórmula (g/L)
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar bacteriológico | 15,0 |
| Sales biliares | 40,0 |
| Esculina | 1,0 |
| Extracto de carne | 3,0 |
| Peptona de carne | 5,0 |
| Citrato férrico | 0,5 |
| Peso total | 64,5 g/L |