Principio y Aplicaciones

El Agar Hierro de Kligler es un medio diferencial utilizado para la caracterización bioquímica de Enterobacterias Gram-Negativas basándose en la fermentación de carbohidratos (glucosa y lactosa) y la producción de ácido sulfhídrico (H?S).

Las peptonas aportan aminoácidos esenciales, minerales, vitaminas y nitrógeno. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. La dextrosa (glucosa) y la lactosa son los carbohidratos fermentables: la fermentación de lactosa produce acidificación en la superficie (amarillo), mientras que la fermentación de dextrosa acidifica el fondo del tubo.

Las bacterias productoras de H?S utilizan el tiosulfato de sodio y el citrato de hierro y amonio, manifestándose por un precipitado negro. El rojo de fenol actúa como indicador de pH.

Uso

Medio diferencial para pruebas bioquímicas de Enterobacterias. Permite caracterizar:

• Fermentación de glucosa (fondo del tubo)
• Fermentación de lactosa (superficie del tubo)
• Producción de ácido sulfhídrico (H?S)
• Producción de gas

Preparación

Medio deshidratado: Suspender 52 gramos en un litro de agua purificada. Calentar con agitación suave hasta completa disolución y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C (15 libras de presión) durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C en posición inclinada.

Procedimiento:

1. Inocular los tubos según procedimientos internos de laboratorio
2. Incubar a 35 ± 2°C durante 18 a 48 horas
3. Leer la producción de ácido en fondo y superficie, así como producción de gas y H?S

Fórmula Típica (g/L)

Control de Calidad

El medio debe ser claro, ligeramente opalescente, de color rojo anaranjado en tubos inclinados. Se evalúan las siguientes características de crecimiento y reacciones bioquímicas: