Principios y Usos
El Agar Hierro y Triple de Azúcar (TSI) es un medio diferencial utilizado para diferenciar las enterobacterias Gram-negativas entéricas basado en la fermentación de carbohidratos y la producción de H₂S. Se utiliza como una ayuda en la identificación de enterobacterias patógenas y saprófitas aisladas del análisis bacteriológico de rutina de muestras de materiales como heces. Este medio se usa para iniciar la identificación de enterobacterias en algunos esquemas de la FDA.
La mezcla de peptona y el extracto de carne proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. TSI contiene tres carbohidratos (dextrosa, sacarosa y lactosa) como fuentes de carbono y energía. Cuando se fermentan, la producción de ácidos se indica mediante el indicador rojo de fenol, siendo el color amarillo para la producción de ácido y rojo para la alcalinización.
El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno, que reacciona con la sal de hierro para dar el sulfuro de hierro de color negro. El citrato de amonio férrico es un indicador de H₂S. El cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico. El agar bacteriológico es el agente solidificante.
El modo de acción es similar a Kligler Iron Agar (Cat. 1042) que contiene dos azúcares. La adición de sacarosa al 1% en TSI Agar permite diferenciar entre Proteus y Salmonella. La fermentación de la sacarosa por Proteus convierte el color del indicador rojo de fenol en la superficie inclinada de rojo a amarillo. Los miembros dextrosa positivos y lactosa negativos del género Salmonella causan enrojecimiento de la superficie inclinada y acidifican las profundidades de los tubos de agar.
La presencia de salmonelas se confirma provisionalmente si en la inoculación profunda, pero no en el cultivo de superficie, hay un cambio de color de rojo a amarillo y, generalmente, una formación de gas, con o sin producción de sulfuro de hidrógeno en el agar. La confirmación precisa puede llevarse a cabo mediante las pruebas bioquímicas y serológicas apropiadas.
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Instrucciones de Uso
Tipo de muestra: Para diagnóstico clínico, el tipo de muestra es heces humanas.
Procedimiento:
- Inocular en profundidad y en superficie. Extender la muestra sobre la superficie inclinada y picar en el fondo del tubo de agar TSI
- Incubar en condiciones aeróbicas a 35±2°C durante 18-72 horas
- Lectura e interpretación de los resultados
Nota importante: El inóculo debe ser una colonia aislada.
Preparación
Suspender 64,6 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver completamente. Dispensar en tubos y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar en una posición inclinada para obtener fondos de 1,5-2,0 cm de profundidad.
pH final: 7,4 ± 0,2 (a 25°C)
