Sellers Agar Fco. 500 g.
Agar Sellers
Medio diferencial para estudios de bacterias gramnegativas no fermentadoras
Principios y Usos
El Agar Sellers es un medio muy útil para identificar y diferenciar bacilos gramnegativos y no fermentadores, como Pseudomonas aeruginosa y Alcaligenes faecalis. La diferenciación se basa en la detección de fluorescencia, oxidación de la glucosa, producción de nitrógeno gaseoso y cambios de pH, a partir de muestras clínicas y otros materiales.
La peptona de gelatina proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. El sulfato de magnesio es un cofactor para varias reacciones metabólicas. El nitrito de sodio proporciona nitrógeno a algunos organismos. La L-Arginina proporciona aminoácidos para el crecimiento. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico. El fosfato dipotásico actúa como un sistema tampón. La fermentación del D-manitol se detecta con azul de bromotimol como un halo amarillo alrededor de las colonias. El rojo fenol es un indicador de pH. El agar bacteriológico es el agente solidificante.
Acinetobacter calcoaceticus se parece morfológicamente a Neisseria y con frecuencia se reporta erróneamente como causa de uretritis gonocócica y meningitis meningocócica (resistente a la penicilina). Para ayudar en la identificación de los no fermentadores, se deben utilizar otros medios como el Medio Basal OF (Cat.1500), el Medio de Indol Nitrito (Cat.1504), etc.
Bajo luz UV solo las Pseudomonas exhiben fluorescencia, que es estimulada por el magnesio y el manitol del medio. A veces, es necesario mantener los tubos durante 2 días para que Pseudomonas produzca una reacción alcalina típica (color azul) en el medio. Después de la incubación, verificar la oxidación de la glucosa mediante la aparición de una banda amarilla, que puede desaparecer después de 24 horas.
Instrucciones de Uso
Inocular el medio pinchando la base del medio con una aguja y sembrar la superficie inclinada. Incubar a 35±2°C durante 18-24 horas.
Preparación
Suspender 43,4 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta su completa disolución. Dispensar en tubos y esterilizar en autoclave a 121°C durante 10 minutos. Dejar enfriar en una posición inclinada para obtener una base del medio de 3,5 cm de profundidad y una superficie inclinada de 7-7,5 cm de largo.
Importante: Inmediatamente antes de la inoculación, agregar 0,15 ml o 2 gotas de solución acuosa al 50% de dextrosa, permitiendo que recorra el lado del tubo opuesto a la inclinación.
Fórmula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptona de gelatina | 20 |
| Extracto de levadura | 1 |
| Sulfato magnésico | 1,5 |
| Cloruro sódico | 2 |
| Fosfato dipotásico | 1 |
| Nitrato de sodio | 1 |
| Nitrito de sodio | 0,35 |
| L-Arginina | 1 |
| D-manitol | 2 |
| Azul de bromotimol | 0,04 |
| Rojo fenol | 0,008 |
| Agar bacteriológico | 13,5 |
| pH final (25°C) | 6,7 ± 0,2 |
Fórmula típica ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.
Control de Calidad
Aspecto del medio deshidratado: Polvo fino, color beige