Listeria Fraser Broth Base ISO Fco. 500 g.
Listeria Fraser Broth Base ISO
Medio de enriquecimiento para la detección y recuento de Listeria en alimentos y muestras ambientales
Principios y Usos
Listeria Fraser Broth Base se utiliza para la detección rápida de Listeria a partir de muestras de alimentos y ambientales. Los antibióticos ya están incluidos en la fórmula, por lo que solo es necesario añadir el Suplemento de Citrato Férrico Amónico (Cat. 6050).
Listeria spp. puede estar presente en pequeñas cantidades y a menudo acompañada por números considerablemente mayores de otros microorganismos, por lo tanto el enriquecimiento selectivo es necesario. Listeria Fraser Broth se utiliza en el enriquecimiento selectivo de Listeria monocytogenes y otras especies de Listeria en todos los tipos de alimentos, incluidos leche y productos lácteos, y muestras ambientales.
El digerido enzimático de caseína, el digerido enzimático de tejidos animales y el extracto de carne proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es la fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. Los fosfatos de potasio actúan como sistema tampón. Todas las especies de Listeria hidrolizan la esculina, que reacciona con los iones férricos produciendo un ennegrecimiento del medio. La adición de citrato férrico amónico mejora el crecimiento de Listeria monocytogenes. El cloruro de litio inhibe el crecimiento de enterococos que pueden hidrolizar la esculina.
Uso e Instrucciones
Detección de Listeria monocytogenes y Listeria spp. según ISO 11290:
Enriquecimiento primario: Pesar 25 g (o 25 ml) de la muestra y añadir 225 ml de Listeria Half Fraser Broth (Cat. 1183). Homogeneizar e incubar a 30 °C durante 25 ± 1 horas.
Enriquecimiento secundario: Inocular 0,1 ml del cultivo incubado de Listeria Half Fraser Broth (independientemente de su color) en 10 ml de Listeria Fraser Broth Base (Cat. 1182) con el Suplemento de Citrato Férrico Amónico (Cat. 6050) añadido. Incubar a 37 °C durante 24 ± 2 horas en condiciones aeróbicas.
Siembra e identificación: Del cultivo de enriquecimiento primario, inocular la superficie del Agar Listeria según Ottaviani y Agosti (Cat. 1345) y otro medio selectivo a elección del laboratorio, para obtener colonias bien separadas. Del cultivo de enriquecimiento secundario, repetir el procedimiento. Para Agar Listeria según Ottaviani y Agosti, incubar durante un total de 48 ± 2 h.
Confirmación: Seleccionar las colonias presuntivas y realizar las pruebas de confirmación para L. monocytogenes o Listeria spp.
Preparación
Suspender 28,7 gramos del medio en 500 ml de agua destilada. Mezclar bien y disolver calentando con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolución completa. Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos. Enfriar a 45–50 °C y añadir asépticamente un vial de Suplemento de Citrato Férrico Amónico (Cat. 6050). Homogeneizar suavemente y dispensar en recipientes estériles.
✓ Conforme a normas ISO 11133 e ISO 11290 — Medio de enriquecimiento selectivo para Listeria en alimentos y muestras ambientales
Fórmula (g/L)
| Componente | Cantidad |
|---|---|
| Digerido enzimático de caseína | 5 g |
| Digerido enzimático de tejidos animales | 5 g |
| Extracto de carne | 5 g |
| Extracto de levadura | 5 g |
| Cloruro de litio | 3 g |
| Cloruro de sodio | 20 g |
| Fosfato dihidrógeno de potasio | 1,35 g |
| Fosfato hidrógeno disódico dihidrato | 12 g |
| Esculina | 1 g |
| Acriflavina | 0,025 g |