Principios y Usos
El Agar para Prueba DNAsa (Actividad Desoxirribonucleasa) se utiliza para diferenciar microorganismos utilizando la correlación entre la coagulasa positiva y la actividad DNasa. Este medio diferencial está especialmente recomendado para la identificación de estafilococos patógenos.
La peptona caseína y la peptona de soja proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico. El ácido desoxirribonucleico permite la detección de la DNasa que despolimeriza el ADN. El agar bacteriológico es el agente solidificante.
Diferenciación Uso General Industria Clínica
Instrucciones de Uso
Tipo de muestra: Colonias aisladas de cualquier muestra clínica.
- Inocular la muestra a analizar mediante una asada de siembra de 10 μl sobre la superficie del agar. Se pueden sembrar simultáneamente de 4 a 5 muestras diferentes en la misma placa.
- Incubar durante 18-24 horas a 35±2°C.
- Después de un crecimiento satisfactorio, agregar una gota de ácido clorhídrico 1N o unas gotas de solución de azul de toluidina al 0,1%. Con algunas cepas, es necesario aumentar la concentración de HCl a 2N para obtener una buena reacción positiva.
- En presencia de ácido clorhídrico diluido, el ADN del medio polimeriza y forma un precipitado opaco. Las colonias de microorganismos capaces de sintetizar desoxirribonucleasas aparecen rodeadas por una zona o halo transparente que contiene fracciones de nucleótidos solubles procedentes de la degradación del ADN, que no son precipitados por el ácido clorhídrico.
Resultados en presencia de HCl:
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DNasa (+): Zona transparente alrededor del área de crecimiento
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DNasa (−): Ausencia de zona transparente alrededor del área de crecimiento
Resultados en presencia de azul de toluidina:
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DNasa (+): Halo rosa alrededor del área de crecimiento. El resto de la placa permanece azul
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DNasa (−): Ausencia de halo rosa alrededor del área de crecimiento
Preparación
Suspender 42 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C, mezclar bien y dispensar en placas.
