Bile Esculin Azide Agar ISO Fco. 500 g.
Agar Bilis Esculina Azida ISO
Aislamiento selectivo e identificación presuntiva de enterococos intestinales por filtración de membrana según ISO 7899-2
Principios y Usos
El Agar Bilis Esculina Azida es una modificación del Agar Bilis Esculina (Cat. 1031) con la adición de azida de sodio como inhibidor y con la reducción de la concentración de bilis. El medio resultante es más selectivo pero sigue proporcionando un crecimiento rápido y recuperación eficiente de enterococos.
La capacidad para hidrolizar la esculina en presencia de bilis es propia de los enterococos. Los organismos positivos para la hidrólisis de esculina hidrolizan el glucósido esculina a escul etina y dextrosa. La esculetina reacciona con el citrato de amonio férrico para formar colonias de color marrón oscuro o negro.
La bilis de buey no inhibe los enterococos mientras que sí inhibe otras bacterias Gram positivas. La azida de sodio inhibe a bacterias Gram negativas. La triptona, la peptona y el extracto de levadura proporcionan los nutrientes esenciales para el crecimiento. El cloruro sódico suministra los electrolitos para mantener el balance osmótico. El agar bacteriológico es el agente solidificante.
La presencia de enterococos intestinales es un indicador de contaminación fecal, especialmente cuando la contaminación se produjo hace tiempo y las bacterias coliformes menos resistentes, incluyendo Escherichia coli, ya pueden estar muertas cuando se lleva a cabo el análisis.
La tolerancia a la bilis y la capacidad para hidrolizar la esculina constituyen una prueba presuntiva confiable para la identificación de enterococos. Aparece un color marrón (reacción positiva) alrededor de las colonias. Se considera que las colonias típicas que muestran un color marrón a negro en el medio circundante dan una reacción positiva y se recuentan como enterococos intestinales.
Instrucciones de Uso
Para la detección y enumeración de enterococos de acuerdo a ISO 7899-2:
- Filtrar un volumen medido de agua a través de un filtro de membrana.
- Colocar la membrana en un medio Slanetz-Bartley (Cat. 1109).
- Incubar a 36±2°C durante 44±4 h.
- Transferir la membrana con colonias características previamente incubadas en el medio de Slanetz-Bartley (Cat. 1109), sin invertir la membrana, a una placa con Agar Bilis Esculina Azida, precalentado a 44°C.
- Incubar a 44±0,5°C durante 2 horas.
- Leer la placa de inmediato.
- Se considera que las colonias típicas que muestran un color marrón oscuro en el medio circundante dan reacciones positivas y se vuelven a contar como Enterococcus intestinal.
Preparación del Medio
Suspender 56,6 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 50-60°C y dispensar en recipientes adecuados.
El sobrecalentamiento puede causar un ennegrecimiento del medio. Si se usan tubos, permitir su enfriamiento en posición inclinada.
Cumple con: ISO 7899-2 — Water quality: Detection and enumeration of intestinal enterococci, Part 2: Membrane filtration method
Fórmula (g/L)
| Componente | g/L |
|---|---|
| Triptona | 17 |
| Agar bacteriológico | 15 |
| Bilis de buey | 10 |
| Extracto de levadura | 5 |
| Cloruro sódico | 5 |
| Peptona | 3 |
| Esculina | 1 |
| Citrato de amonio férrico | 0,5 |
| Azida de sodio |