Principios y Usos

Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias con base a la producción de sulfuro de hidrógeno, indol y movilidad.

En el medio, la peptona de caseína y la peptona de carne proveen los aminoácidos esenciales para el crecimiento, vitaminas, minerales y nitrógeno. El tiosulfato de sodio y el sulfato de hierro y amonio son adicionados como indicadores de la producción de H?S. El agar bacteriológico permite observar la movilidad de los microorganismos.

El triptófano es un aminoácido que forma parte de muchas peptonas, particularmente de la peptona caseína, el cual puede ser oxidado por algunas bacterias para formar indol. El indol producido se combina con aldehído del reactivo Kovács o de Erlich para generar un producto de color rojo. Las bacterias móviles pueden distinguirse por la turbidez que se presenta alrededor de la punción de siembra, mientras que las cepas productoras de sulfhídrico forman un precipitado negro.

Uso y Procedimiento

1. Inocular cada tubo por picadura en el centro hasta las 2/3 partes, de acuerdo a los procedimientos establecidos.
2. Incubar en condiciones aeróbicas con las tapas flojas a 35 ± 2°C.
3. Examinar los tubos de 18 a 24 h para crecimiento, movilidad y producción de H?S y posteriormente realizar la prueba de indol.

Preparación

Suspender 30 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar y calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante 1 minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45–50°C y dispensar en tubos estériles.

Fórmula (por litro)

Control de Calidad

Interpretación de Resultados

• Movilidad positiva: turbidez en el medio
• Movilidad negativa: crecimiento solo en la picadura
• H?S positivo: ennegrecimiento en las áreas del medio donde hay crecimiento
• Indol positivo: anillo rosa a rojo al adicionar 3–4 gotas de reactivo de Kovács
• Indol negativo: sin cambio de color; si la reacción es negativa, incubar por 24 h adicionales

Cepas de Referencia