Principios y Fundamentos

El Medio Líquido de Tioglicolato sin Dextrosa y sin Indicador se utiliza para la detección de microorganismos en pruebas de esterilidad. Este medio adicionado con carbohidratos puede utilizarse para estudios de fermentación para microorganismos anaerobios.

Esta formulación es una modificación del Tioglicolato tradicional, en la que se elimina la dextrosa y se adiciona una peptona para facilitar estudios de fermentación, y se elimina el indicador para evitar cualquier grado de toxicidad que pueda interferir en la recuperación de microorganismos.

El tioglicolato sin dextrosa y sin indicador es uno de los medios de cultivo más utilizados en diagnóstico bacteriológico, debido a su alto contenido en factores nutritivos como la peptona de caseína (fuente de nitrógeno), el extracto de levadura (fuente de vitaminas) y el cloruro de sodio (mantiene el balance osmótico). El tioglicolato de sodio y la L-cistina bajan el potencial de óxido-reducción del medio, creando una atmósfera de anaerobiosis en la profundidad del tubo, permitiendo así el crecimiento de bacterias anaeróbicas.

Aplicaciones y Uso

• Cultivo y aislamiento de microorganismos anaerobios
• Detección de microorganismos en pruebas de esterilidad
• Estudios de fermentación de carbohidratos (adicionando 0.5-1% de carbohidratos)
• Diagnóstico bacteriológico general
• Recuperación de anaerobios en condiciones de bajo potencial redox

Preparación y Método

Reconstitución: Suspender 24 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar bien y calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. No sobrecalentar. Dispensar en tubos. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar a temperatura ambiente y proteger de la luz. Almacenar con tapa bien cerrada.

Recomendación: Se recomienda calentar los tubos a ebullición y enfriarlos a temperatura ambiente antes de utilizarlos.

Procedimiento:

1. Inocular directamente la muestra o el microorganismo de acuerdo a los procedimientos establecidos
2. Para estudios de fermentación con la adición de los diferentes carbohidratos (0.5 al 1%), inocular los tubos con cultivos puros
3. Incubar a 35 ± 2°C de 24 a 48 horas o hasta 5 días en atmósfera aeróbica o anaeróbica

Fórmula Típica (g/L)

Control de Calidad Microbiológico

Las siguientes cepas se utilizan como control de calidad del medio y deben presentar el crecimiento descrito en condiciones de incubación apropiadas: