Principios y Fundamento

En 1915, Clark y Lubs demostraron que al agregar rojo de metilo a cultivos de Escherichia coli se observa un color rojo debido a la alta acidez producida por la fermentación de la dextrosa, mientras que Klebsiella pneumoniae y Enterobacter aerogenes producen pequeñas cantidades de ácido que es convertido a acetoides resultando en una reacción alcalina.

La prueba para detectar a los altos productores de ácido es conocida como Rojo de Metilo (RM). La prueba para detectar a los bajos productores de ácido está basada en el procedimiento descrito por Voges y Proskauer en 1898, donde se presenta una reacción colorida cuando los cultivos se incuban en un medio con dextrosa y peptona y se les adiciona hidróxido de potasio exponiéndolos al aire. Esta reacción pone de manifiesto la formación de acetilmetilcarbinol y es conocida como la prueba de Voges-Proskauer (VP).

Las peptonas proporcionan la fuente de carbono y nitrógeno necesarios para el desarrollo bacteriano. La dextrosa es el carbohidrato fermentable y el fosfato actúa como amortiguador del pH.

Uso Recomendado

Medio utilizado para la identificación bacteriana basado en las reacciones de Rojo de Metilo (RM) y Voges-Proskauer (VP), especialmente en la diferenciación de miembros de la familia Enterobacteriaceae según sus patrones de fermentación de la glucosa.

Preparación del Medio

Procedimiento de Ensayo

1. Inocular las muestras de acuerdo a los procedimientos internos de laboratorio o normas aplicables.
2. Incubar los tubos en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 24 a 48 horas.
3. Prueba RM: Transferir 2.5 mL del medio a un tubo y adicionar 5 gotas del indicador rojo de metilo. Observar la formación de color.
4. Prueba VP: Transferir 2.5 mL del medio a un tubo y adicionar 6 gotas del reactivo de alfa-naftol al 5% y 2 gotas del reactivo de KOH al 40%. Agitar y dejar reposar por 10 minutos.

Fórmula Típica (g/L)

Control de Calidad

Aspecto del medio deshidratado: Polvo fino de color beige claro, homogéneo y de flujo libre.
Aspecto del medio preparado: Líquido transparente de color ámbar claro.
Condiciones de incubación: 35 ± 2°C en aerobiosis durante 24-48 horas.

Características Microbiológicas