Medios de Cultivo Microbiológicos
Agar Vogel-Johnson
Aislamiento selectivo de Staphylococcus aureus en muestras de alimentos
Principios y Usos
El Agar Vogel-Johnson es un medio selectivo y diferencial utilizado para la detección temprana de Staphylococcus aureus mediante la identificación de cepas coagulasa positivas y la fermentación de manitol.
S. aureus reduce el telurito de potasio al metal teluro y da como resultado el crecimiento de colonias negras. La fermentación del manitol está indicada por las zonas amarillas alrededor de las colonias negras y cambia el color rojo del medio a amarillo.
La triptona proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. El manitol es el carbohidrato fermentable que proporciona el telurito de potasio y carbono, el cloruro de litio y la alta concentración de glicina inhiben la mayoría de los microorganismos que no son estafilococos. El rojo fenol es el indicador de pH. El fosfato de dipotasio actúa como tampón. El agar bacteriológico es el agente solidificante.
Instrucciones de Uso
Las placas de Agar Vogel-Johnson se pueden sembrar en abundancia con un hisopo e incubar a 35±2°C durante 24-48 horas. Observar si aparecen colonias negras rodeadas por una zona amarilla.
Durante las primeras 24 horas, la mayoría de los microorganismos, excepto los estafilococos coagulasa positivo, están total o marcadamente inhibidos. A las 48 horas comienzan a aparecer muchos estafilococos coagulasa negativo, manitol positivo y manitol negativo.
El Staphylococcus epidermidis, casi siempre inhibido al comienzo, forma pequeñas colonias de color grisáceo sin zonas amarillas. Los estafilococos coagulasa positivos forman colonias negras en el medio rojo. Si fermentan manitol, las colonias están rodeadas por una zona amarilla. Los organismos negativos al manitol no cambian el color rojo del medio.
Preparación del Medio
Suspender 60 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta su completa disolución.
Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C y agregar asépticamente 6 ml de telurito de potasio al 3,5% (Cat. 5208). Homogeneizar suavemente y dispensar en placas de Petri.
Nota: Para preparar un medio menos selectivo, agregar solamente 3 ml de 3,5% de telurito de potasio.
Fórmula del Medio
| Componente | Cantidad (g/L) |
| Triptona | 10 |
| Extracto de levadura | 5 |
| D-manitol | 10 |
| Glicina | 10 |
| Cloruro de litio | 5 |
| Fosfato dipotásico | 5 |
| Rojo fenol | 0,025 |
| Agar bacteriológico | 15 |
| pH Final (25°C) | 7,2 ± 0,2 |
* Fórmula típica ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.
Control de Calidad
Medio deshidratado: Polvo fino de color rosa, sin restos. Medio preparado: Color rojo, ligeramente opalescente. Solubilidad: Total.
Test Microbiológico
| Microorganismo | Especificación | Reacción Característica |
|
Staphylococcus aureus ATCC 25923 | Buen crecimiento |
