Medio de Diferenciación · Enterobacterias
Agar de Fenilalanina
Para la diferenciación de bacilos entéricos que desaminan fenilalanina a ácido fenilpirúvico
Diferenciación Industria Alimentación Cat. 1040
Principios y Usos
El Agar de Fenilalanina es un medio sólido utilizado para diferenciar especies de Proteus, Providencia y Morganella de otras Enterobacterias, basado en la desaminación de la fenilalanina en ácido fenilpirúvico por actividad enzimática. La fórmula se prepara de acuerdo con Ewing et al. (1957).
Algunas cepas de Enterobacter y algunos bacilos Gram-negativos no fermentadores también pueden desaminar la fenilalanina.
La DL-fenilalanina se desamina en ácido fenilpirúvico. El extracto de levadura proporciona vitaminas, particularmente del grupo B, y otros nutrientes para el crecimiento. El cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico. El fosfato de sodio es el amortiguador y el agar bacteriológico es el agente solidificante.
Instrucciones de Uso
Para diagnóstico clínico: el tipo de muestra es bacterias aisladas de cualquier muestra clínica.
- Inocular con el organismo de muestra
- Incubar durante 18-24 horas a 35±2 °C
- Lectura e interpretación de los resultados
Revelado: Agregar de 4 a 5 gotas de cloruro férrico al 10%. La aparición inmediata de un color verde intenso (1 a 5 minutos) indica la presencia de ácido fenilpirúvico.
Para diferenciar Proteus y Providencia: sembrar en abundancia los microorganismos sospechosos en la Base de Agar Urea (Christensen - Cat. 1110) o en Caldo Urea (Cat. 1226). Proteus hidroliza la urea. Providencia es negativo para la producción de ureasa.
Preparación
Suspender 23 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo.
Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos. Dejar enfriar en posición inclinada.
Fórmula Típica (g/L)
| Componente | g/L |
| Agar bacteriológico | 12 |
| DL-Fenilalanina | 2 |
| Cloruro sódico | 5 |
| Extracto de levadura | 3 |
| Fosfato sódico | 1 |
| TOTAL | 23 g/L |
* Fórmula típica ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.
Control de Calidad Fisicoquímico
Aspecto del medio deshidratado: Polvo fino, color beige
Aspecto del medio preparado: Ámbar, ligeramente opalescente
Solubilidad: Sin restos
pH final (25 °C): 7,3 ± 0,2
Control de Calidad Microbiológico
| Microorganismo | Crecimiento | Desaminación Fenilalanina |
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Klebsiella aerogenes ATCC 13048 | |
