Principios y Usos

Agar Entérico Hektoen es un medio selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciación de patógenos entéricos Salmonella y Shigella, ambos causantes de una variedad de enfermedades gastrointestinales graves en humanos; y otras Enterobacteriaceae Gram-negativas.

Se usa particularmente en alimentos donde se siguen varios pasos para aislar los patógenos de la gastroenteritis. Los nutrientes para el crecimiento son proporcionados por la peptona de carne y el extracto de levadura. El aumento de contenido en peptona y los tres hidratos de carbono fermentables (lactosa, sacarosa, salicina) como fuentes de carbono y energía, reducen la acción inhibidora de las sales biliares en Salmonella y Shigella spp.

La concentración de lactosa en este medio es mayor que la de otros medios utilizados para la visualización de patógenos entéricos y minimiza el problema de la fermentación retardada de lactosa. El azul de bromotimol y la fucsina ácida son indicadores de pH. El tiosulfato de azufre proporciona azufre y el citrato de amonio férrico es el indicador de la producción de H?S. Las colonias positivas de H?S forman centros negros. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico.

Aunque suprimidos, parcialmente inhibidos, E. coli y otros organismos que usan lactosa, sacarosa y/o salicina con la producción de ácido, dan colonias de color salmón a amarillo naranja. Salmonella y Shigella son verdes o verde azuladas. Proteus no se inhibe, pero produce una colonia verde-amarilla cuando crece. Las colonias de Proteus y Salmonella pueden presentar un centro negro y bordes claros si forman sulfuro como resultado de la producción de H?S.

Instrucciones de Uso

Para diagnóstico clínico (Tipo de muestra: heces)

• Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo. La inoculación también se puede hacer a partir de un cultivo de preenriquecimiento.
• Incubar a 35±2 °C durante 18–24 horas.
• Lectura e interpretación de los resultados.

Para otros usos no amparados por el marcado CE

Recuento de Shigella spp. según la ISO 21567:

• Sembrar la muestra directamente sobre la superficie del medio, o previamente enriquecida en Caldo de Tetrationato (Cat. 1114), Caldo de Selenito y Cistina (Cat. 1220), Caldo GN (Cat. 1248), o Caldo Shigella (Cat. 2078) para la detección de Shigella.
• Incubar a 37±1 °C durante 20–24 horas.
• Se recomienda sembrar la muestra en otro medio selectivo al mismo tiempo para Enterobacteriaceae, ya que se obtendrá un mayor número de cultivos positivos. Estos medios pueden ser, por ejemplo, Agar Eosina y Azul de Metileno (Cat. 1039), Agar MacConkey (Cat. 1052), Agar SS (Cat. 1064), Agar Verde Brillante (Cat. 1010), Agar Lactosa Desoxicolato (Cat. 1025), o Agar XLD (Cat. 1080).

Preparación

Suspender 75,6 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta la disolución completa.

EVITAR EL SOBRECALENTAMIENTO. NO AUTOCLAVAR.

Enfriar a 47 °C y dispensar en placas de Petri.