Principios y Usos
El Agar Bilis Verde Brillante se utiliza para evaluar el grado de contaminación de las muestras de agua, diversos alimentos y otros productos. Utiliza fucsina básica para diferenciar entre las bacterias que fermentan la lactosa de las que no la fermentan. La producción de ácido por parte de organismos fermentadores de lactosa, como Escherichia coli, produce características colonias rojas con un área rosada circundante. Los no fermentadores de lactosa forman colonias incoloras y transparentes.
La peptona de gelatina proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. La lactosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. La bilis de buey y el verde brillante inhiben las bacterias grampositivas y la mayoría de las bacterias gramnegativas, excepto los coliformes. La erioglaucina y la fucsina básica indican conjuntamente el pH del medio. El fosfato monopotásico actúa como sistema tampón. El agar bacteriológico es el agente solidificante.
Aplicaciones: Recuento selectivo y diferenciación de coliformes en agua de consumo y alimentación
Uso e Instrucciones
Para la enumeración de bacterias coliformes, emplear diluciones de la muestra que produzcan entre 10 y 50 colonias por placa utilizando el método de vertido en placa. Incubar a 35±2°C durante 18-24 horas.
Resultados característicos: Las colonias de coliformes tienen una zona central intensamente roja rodeada por un halo rosa que está claramente delineado contra el fondo azul uniforme del medio. Salmonella spp., que no fermenta la lactosa, produce colonias de incoloras a rosas pálidas.
? Importante: El medio es sensible a la luz, lo que reduce su efectividad y cambia su color de azul fuerte a púrpura o rosa. El medio debe prepararse inmediatamente antes del uso y, si es necesario, almacenarse en la oscuridad durante el menor tiempo posible.
Preparación
Suspender 20,6 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta su completa disolución. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C, mezclar bien y dispensar en placas.
pH final: 6,9 ± 0,2 a 25°C
