Principios y Usos

Agar MRS es un medio selectivo, basado en la formulación desarrollada por de Man, Rogosa y Sharpe. Proporciona los nutrientes para un buen crecimiento de los lactobacilos en general, pero en especial de aquellas cepas que presentan un crecimiento deficiente en otros medios existentes previamente como L. brevis y L. fermenti, reemplazando un producto variable (zumo de tomate).

El medio es apto para el crecimiento de bacterias del ácido láctico, incluidos Lactobacillus, Pediococcus y Leuconostoc.

El citrato de amonio, a un pH bajo, inhibe la mayoría de los microorganismos, pero permite el crecimiento de Lactobacilli. El fosfato dipotásico y el acetato de sodio son agentes amortiguadores para mantener un pH bajo. Tween 80 es un emulsionante. Los sulfatos de manganeso y magnesio son fuentes de iones y sulfato. La peptona bacteriológica y el extracto de carne proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable. El agar bacteriológico es el agente solidificante.

Los lactobacilos son microaerofílicos y generalmente requieren placas en capas para el cultivo aeróbico en medios sólidos. Las colonias sumergidas o superficiales pueden ser compactas o plumosas, y son pequeñas, opacas y blancas.

Instrucciones de Uso

Para la enumeración de bacterias mesófilas ácido lácticas:

1. Verter 1 ml de la muestra previamente diluida en una placa de Petri estéril.
2. Añadir una primera capa del medio enfriado (45-50°C).
3. Después de la solidificación, se vierte una segunda capa.
4. Incubar las placas hasta 3 días a 35°C o hasta 5 días a 30°C. Si es posible, incubar las placas en una atmósfera de CO₂.
5. Es importante mantener una atmósfera húmeda porque las placas no deben secarse durante la incubación.
6. El crecimiento de algunas cepas de Lactobacillus se inhibe a un pH más alto de 6.0 y es necesario acidificar los medios para promover el crecimiento. Para acidificar el medio se pueden añadir unas gotas de ácido acético.

Preparación

Suspender 62 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disuelva calentando con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 12 minutos. Enfriar a 45-50°C, mezclar bien y dispensar en placas.

Fórmula (g/L)