Ficha Técnica · Medio de Cultivo
Agar Mueller Hinton con 5% de Sangre de Carnero
MCD LAB · Placas Preparadas
Medio preparado
7644Cat. No. · MCD LAB
USO
Medio recomendado para pruebas de susceptibilidad antimicrobiana de Streptococcus pneumoniae por el método de difusión en disco (Kirby-Bauer), siguiendo las recomendaciones del CLSI.
PRINCIPIOS Y USOS
El Agar Mueller Hinton es el medio estándar recomendado por el CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) para pruebas de susceptibilidad antimicrobiana de organismos aeróbicos de crecimiento rápido. Fue originalmente desarrollado para el cultivo de gonococos y posteriormente seleccionado para antibiogramas por su buena reproductibilidad y composición simple.
El procedimiento Kirby-Bauer se basa en la difusión de agentes antimicrobianos contenidos en discos de papel sobre el agar. El medio presenta bajo contenido de timina y timidina, inhibidores de sulfonamidas y trimetoprim, lo que permite un crecimiento adecuado de la mayoría de los patógenos.
La infusión de carne y la peptona de caseína H aportan nitrógeno, vitaminas, carbono y aminoácidos. El almidón absorbe metabolitos tóxicos. La sangre de carnero desfibrinada al 5% aporta factores de crecimiento indispensables para el desarrollo de Streptococcus pneumoniae.
| Componente |
Cantidad |
| Infusión de carne |
300.0 g |
| Peptona de caseína H |
17.5 g |
| Sangre de carnero desfibrinada |
50.0 mL |
| Almidón |
1.5 g |
| Agar bacteriológico |
17.0 g |
| pH 7.4 ± 0.2 a 25°C |
PREPARACIÓN
Método
Suspender 38 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar bien y calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar a 45–50°C, adicionar asépticamente sangre de carnero desfibrinada al 5%. Vaciar en placas de Petri estériles.
Procedimiento
- Inocular las placas estriando con un hisopo impregnado con suspensión del microorganismo ajustada al estándar de turbidez 0.5 de McFarland (o absorbancia de 0.08–0.1 a 625 nm).
- Colocar sobre el agar, con ligera presión, los discos impregnados con los antibióticos indicados, usando pinzas estériles o dispensador.
- Incubar las placas en posición invertida 24 h a 35 ± 2°C en atmósfera de 5–10% de CO₂.
CARACTERÍSTICAS MICROBIOLÓGICAS
| Microorganismo |
ATCC |
Agente Antimicrobiano |
Especificación (Diámetro Inhibición) |
Crecimiento |
% Recuperación |
| Streptococcus pneumoniae |
49619 |
Oxacilina 1 µg |
≤ 19 mm |
Bueno |
≥80% |
Interpretar los halos de inhibición conforme a las tablas del CLSI vigentes para S. pneumoniae.
PRESENTACIÓN Y ALMACENAMIENTO
| Cat. No. |
Presentación |
Almacenamiento |
| 7644 |
Medio preparado en Placa (Pqte/10 Placas) |
2–8°C |
Distribuidor autorizadoFROGGSLABMCD LAB — Especialistas en Medios de Cultivo
